The primary probe is incubated with the membrane in a manner similar to that for the primary antibody in a two-step process, and then is ready for direct detection after a series of wash steps. يتم احتضان الملتقط الأولي مع الغشاء بطريقة مشابهة للجسم المضاد الأولي في طريقة الخطوتين، ومن ثم يكون جاهز للكشف بعد سلسلة من خطوات الغسل.
They are incubated for 29 to 33 days, mainly by the female, with the male also helping with the incubation of the eggs during the day, but only the female incubating them at night. ترخم الأنثى بشكل رئيسي على بيضها لفترة تتراوح بين 29 إلى 33 يوما، ويُساعد الذكر على رخم البيض خلال النهار، أما في الليل فإن عبء الحضن يقع على الأنثى وحدها.
The plant cells are subjected to a strongly alkaline solution containing a detergent (usually a zwitterionic or nonionic detergent such as Tween 20), and the mixture is incubated at high temperature. يتم تعريض الخلايا المستنبتة لمحلول قلوي قوي يحتوى على مادة مطهرة (عادة ما تكون مادة مطهرة تتضمن أيون هجين أو مادة غير متأينة مثل توين 20), ويتم حفظ الخليط في درجة حرارة عالية.
If antibodies have bound to RBC surface antigens in the first stage, RBCs will agglutinate when incubated with the antihuman globulin (also known Coombs reagent) in this stage, and the indirect Coombs test will be positive. إذا ارتبطت الأجسام المضادة بمستضدات سطح كريات الدم الحمراء في المرحلة الأولى، سوف تتراكم كرات الدم الحمراء عندما تحضينها مع الجلوبيولين غير البشري (المعروف أيضا بكاشف كومبس) في هذه المرحلة، سوف تكون نتيجة اختبار كومبس غير المباشر إيجابية.